एडेनोवायरस रैपिड टेस्ट-नाक स्राव

उपयोग का उद्देश्य:

SARS-CoV-2 न्यूक्लिक एसिड टेस्ट किट नासॉफिरिन्जियल स्वैब, ऑरोफरीन्जियल स्वैब और थूक में COVID-19 के न्यूक्लिक एसिड की गुणात्मक पहचान पर लागू होती है। परीक्षण के परिणाम संक्रमण या संदिग्ध रोगियों के लिए आणविक निदान आधार प्रदान करते हैं, और नैदानिक ​​​​निदान के लिए एकमात्र मानदंड के रूप में उपयोग नहीं किया जाना चाहिए।

सामग्री:

परीक्षण प्रक्रिया:

ए नमूना तैयार करना

निकाला गया आरएनए SARS-CoV-2 न्यूक्लिक एसिड टेस्ट किट के लिए प्रारंभिक सामग्री है।

महत्वपूर्ण: प्रत्येक न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण प्रक्रिया को एक सकारात्मक नियंत्रण (40 μL, बाँझ खारा समाधान / वांछित मात्रा में पीबीएस के साथ पतला) और एक नकारात्मक नियंत्रण (40 μL, बाँझ खारा समाधान के साथ पतला/वांछित मात्रा में पीबीएस) के साथ एक साथ किया जाना चाहिए।

निम्नलिखित वाणिज्यिक न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण किट का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है: PureLinkTM वायरल आरएनए / डीएनए मिनी किट (इनविट्रोजन); वायरल आरएनए मिनी किट (क्यूजेन); TIANamp हाय-डीएनए/आरएनए किट (टियांजेन);

बी रिएक्शन मिक्स सेटअप

1. सभी अभिकर्मकों और नमूनों को पूरी तरह से पिघलाया जाना चाहिए, पूरी तरह से मिश्रित किया जाना चाहिए और उपयोग करने से पहले कमरे के तापमान (लगभग 18 से 25 डिग्री) पर संक्षेप में सेंट्रीफ्यूज किया जाना चाहिए।

2. एक उचित आकार के पॉलीप्रोपाइलीन माइक्रोसेंट्रीफ्यूज ट्यूब में रिएक्शन मिक्स की आवश्यक मात्रा तैयार करें।

3. एक उपयुक्त ऑप्टिकल 96-वेल रिएक्शन प्लेट या एक उपयुक्त ऑप्टिकल रिएक्शन ट्यूब के प्रत्येक आवश्यक कुएं में रिएक्शन मिक्स का पिपेट 25 डिग्री सेल्सियस।

सी टेम्पलेट जोड़

1. नमूने/सकारात्मक नियंत्रण/नकारात्मक नियंत्रण से निकाले गए आरएनए के 5 डिग्री एल जोड़ें। कुल मात्रा 30 μL है।

2. ऊपर और नीचे/भंवर को पाइप करके रिएक्शन मिक्स के साथ नमूनों और नियंत्रणों को अच्छी तरह मिलाएं।

3. 96-वेल रिएक्शन प्लेट को उपयुक्त लिड्स या ऑप्टिकल एडहेसिव फिल्म और रिएक्शन ट्यूबों को उपयुक्त लिड्स से बंद करें।

4. लगभग 2500rpm पर 30 सेकंड के लिए एक microtiter प्लेट रोटर के साथ एक केंद्रापसारक में 96-अच्छी तरह से प्रतिक्रिया प्लेट केंद्रापसारक ।

डी. रीयल-टाइम पीसीआर इंस्ट्रूमेंट प्रोग्रामिंग

विभिन्न रीयल-टाइम पीसीआर उपकरणों के सेटअप और प्रोग्रामिंग के बारे में बुनियादी जानकारी के लिए, कृपया संबंधित उपकरण के उपयोगकर्ता पुस्तिका देखें। परख को एबीआई7500 रीयल-टाइम पीसीआर सिस्टम के लिए अनुकूलित किया गया है। पीसीआर रन साइक्लिंग शर्तों के साथ किया जाता है जैसा कि नीचे दी गई तालिका में वर्णित है।

प्रतिदीप्ति डिटेक्टरों को परिभाषित करें

*कृपया साधन के प्रतिदीप्ति आंतरिक संदर्भ को "कोई नहीं" पर सेट करें, उदाहरण के लिए: ABI श्रृंखला के उपकरणों के लिए "निष्क्रिय संदर्भ" को "कोई नहीं" पर सेट करें।

ई. डेटा विश्लेषण

कृपया विश्लेषण पैरामीटर सेट करें और संबंधित उपकरणों के ऑपरेटिंग निर्देशों के अनुसार डेटा का विश्लेषण करें।

उदाहरण के तौर पर एबीआई 7500 को लें:

आधार रेखा को एक ऐसी सीमा पर सेट किया जाना चाहिए जो प्रवर्धन के प्रारंभिक चक्रों में पाए जाने वाले पृष्ठभूमि प्रतिदीप्ति को समाप्त कर देता है, लेकिन जो उस क्षेत्र को ओवरलैप नहीं करता है जहां प्रवर्धन संकेत पृष्ठभूमि से ऊपर उठते हैं (प्रारंभ मान: 3 ~ 10; अंतिम मान: {{2} }). साइकिल थ्रेशोल्ड (सीटी) घातीय चरण के आधार पर होना चाहिए। स्वचालित रूप से विश्लेषण परिणाम प्राप्त करने के लिए "विश्लेषण" पर क्लिक करें, और "रिपोर्ट" विंडो में पता लगाने के परिणाम पढ़ें।

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